方法身份
- 现行版
- HJ 505-2009
- 名称
- 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法
- 发布日期
- 2009-10-20
- 实施日期
- 2009-12-01
- 代替
- GB 7488—87(封面写作 GB/T 7488—1987)
- 状态
- 现行 · 2026-11-02 核查
- 相关标准
- GB/T 7489(溶解氧 碘量法);GB/T 11913(溶解氧 电化学探头法,现已由 HJ 506-2009 代替);HJ/T 91(采样)
适用范围
- 适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量(BOD5)的测定。(第 1 章)
- 检出限 0.5 mg/L,测定下限 2 mg/L;非稀释法和非稀释接种法测定上限 6 mg/L,稀释与稀释接种法测定上限 6 000 mg/L。(第 1 章)
- BOD5 不大于 6 mg/L 且微生物足够用非稀释法;微生物不足(酸性、碱性、高温、冷冻保存或经氯化处理的废水等)用非稀释接种法;大于 6 mg/L 时用稀释法或稀释接种法。(7.1、7.2)
- 培养条件:(20±1)℃ 暗处培养 5 d±4 h,或先在 0~4 ℃ 暗处 2 d、再在(20±1)℃ 暗处 5 d,即(2+5)d±4 h。(第 3 章)
- 样品充满并密封于棕色玻璃瓶,不少于 1 000 mL,0~4 ℃ 暗处运输保存,24 h 内尽快分析;不能分析的可冷冻保存,分析前解冻、均质化和接种。(6.1)
- 样品或稀释后样品 pH 不在 6~8 时先调节;余氯用亚硫酸钠去除;有大量藻类且精度要求高时用 1.6 μm 滤膜过滤并在报告中注明孔径。(6.2.1、6.2.2、6.2.4)
原理:微生物分解水中可氧化物质(特别是有机物)的生物化学过程消耗溶解氧;水样充满密闭溶解氧瓶在规定条件下培养,由培养前后溶解氧质量浓度之差计算每升样品消耗的溶解氧量,以 BOD5 表示(第 3 章)。
计算公式与符号说明
非稀释法(8.1 式(3))
ρ = ρ₁ − ρ₂
- ρ
- 五日生化需氧量质量浓度,mg/L
- ρ₁
- 水样在培养前的溶解氧质量浓度,mg/L
- ρ₂
- 水样在培养后的溶解氧质量浓度,mg/L
非稀释接种法(8.2 式(4))
ρ = (ρ₁ − ρ₂) − (ρ₃ − ρ₄)
- ρ₁、ρ₂
- 接种水样在培养前、培养后的溶解氧质量浓度,mg/L
- ρ₃、ρ₄
- 空白样在培养前、培养后的溶解氧质量浓度,mg/L
稀释法与稀释接种法(8.3 式(5))
ρ = [(ρ₁ − ρ₂) − (ρ₃ − ρ₄) × f₁] ÷ f₂
- ρ₁、ρ₂
- 接种稀释水样(稀释水样)在培养前、培养后的溶解氧质量浓度,mg/L
- ρ₃、ρ₄
- 空白样在培养前、培养后的溶解氧质量浓度,mg/L
- f₁
- 接种稀释水或稀释水在培养液中所占的比例
- f₂
- 原样品在培养液中所占的比例
例如 100 mL 样品稀释至 1 000 mL:f₂ = 0.1,f₁ = 0.9。有几个稀释倍数的结果满足要求时,取这些稀释倍数结果的平均值(8.3)。
平行样相对百分偏差(9.3 式(6))
RP = (ρ₁ − ρ₂) ÷ (ρ₁ + ρ₂) × 100%
- RP
- 相对百分偏差,%
- ρ₁
- 第一个样品 BOD5 的质量浓度,mg/L
- ρ₂
- 第二个样品 BOD5 的质量浓度,mg/L
限值按绝对值判:BOD5 <3 mg/L 时 ≤±15%,3~100 mg/L 时 ≤±20%,>100 mg/L 时 ≤±25%。
结果表示
- 以氧的质量浓度(mg/L)报出:小于 100 mg/L 保留一位小数;100~1 000 mg/L 取整数位;大于 1 000 mg/L 以科学计数法报出。(8.3)
- 报告中注明样品是否经过过滤、冷冻或均质化处理。(8.3)
- 大于 1 000 mg/L 时保留几位有效数字,标准没有规定;立方 LIMS 模板默认按 3 位有效数字,属机构规定。低于检出限的写法标准也未规定,模板默认“0.5L”,属机构规定。进舍规则标准未规定,示例按 GB/T 8170 一次修约到位(四舍六入五成双),属机构规定。(机构规定)
计算示例(合成数据)
以下数据为合成数据,只演示计算过程,不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎(十进制运算)在网站构建时算出,修约按本页“结果表示”写明的规则;所用公式就是本库专用模板里的那一份;页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序,按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算:稀释接种法,两个稀释倍数取平均(合成数据)
稀释接种法,电化学探头法测溶解氧,培养方式 5 d±4 h,培养箱 20.1 ℃;稀释水曝气后溶解氧 8.60 mg/L。一批两个接种稀释水空白、一个葡萄糖-谷氨酸标准样品;样品做 10 倍和 20 倍两个稀释倍数,10 倍另做平行瓶。
| 瓶 | 角色 | 原样品 / 总体积(mL) | 培养前 | 培养后 |
|---|---|---|---|---|
| B1 | 空白 | — | 8.80 | 8.10 |
| B2 | 空白 | — | 8.85 | 8.05 |
| C1 | 葡萄糖-谷氨酸标准样品 | 20 / 1000 | 8.70 | 4.20 |
| S10 | 样品(10 倍) | 100 / 1000 | 8.60 | 4.30 |
| S20 | 样品(20 倍) | 50 / 1000 | 8.70 | 5.70 |
| P10 | 平行瓶(10 倍) | 100 / 1000 | 8.62 | 4.40 |
- 培养时长 120.5 h,在 5 d±4 h(116~124 h)内:符合;培养温度在(20±1)℃:符合
- 空白消耗 (ρ₃ − ρ₄) 取两瓶均值 = [(8.80 − 8.10) + (8.85 − 8.05)] ÷ 2 = 0.75 mg/L,不超过 1.5 mg/L(9.1):符合
- 标准样品:f₂ = 20 ÷ 1000 = 0.02,f₁ = 0.98;ρ = (4.50 − 0.75 × 0.98) ÷ 0.02 = 188.25 mg/L,在 180~230 mg/L(9.2):符合
- 10 倍:消耗 4.30 mg/L ≥2,剩余 4.30 mg/L ≥2(7.2.1.1);ρ = (4.30 − 0.75 × 0.9) ÷ 0.1 = 36.25 mg/L
- 20 倍:消耗 3.00 mg/L,剩余 5.70 mg/L,同样满足要求;ρ = (3.00 − 0.75 × 0.95) ÷ 0.05 = 45.75 mg/L
- 两个稀释倍数都满足要求(共 2 个),取平均(8.3):(36.25 + 45.75) ÷ 2 = 41 mg/L;小于 100 mg/L 保留一位小数,报 41.0 mg/L
- 平行瓶 ρ = 35.45 mg/L;RP = |36.25 − 35.45| ÷ (36.25 + 35.45) × 100% ≈ 1.1%,在 3~100 mg/L 档不超过 ±20%(9.3):符合
修约:非稀释接种法、(2+5)d 培养、五成双(合成数据)
非稀释接种法,碘量法测溶解氧,先 0~4 ℃ 暗处 2 d 再(20±1)℃ 暗处 5 d;培养时长 169 h,在(2+5)d±4 h(164~172 h)内:符合。
- 空白消耗 (ρ₃ − ρ₄) 取两瓶均值 = [(8.80 − 8.25) + (8.70 − 8.15)] ÷ 2 = 0.55 mg/L,不超过 1.5 mg/L(9.1):符合
- 式(4):ρ = (8.90 − 6.10) − 0.55 = 2.25 mg/L;不大于 6 mg/L(第 1 章):符合
- 保留一位小数:拟舍弃的数字为 5 且其后无数字,保留的末位 2 为偶数,舍去,报 2.2 mg/L(进舍按 GB/T 8170,机构规定)
- 平行瓶 ρ = (8.88 − 6.05) − 0.55 = 2.28 mg/L;RP = |2.25 − 2.28| ÷ (2.25 + 2.28) × 100% ≈ 0.7%,BOD5 小于 3 mg/L,限值 ±15%(9.3):符合
不合格情形:稀释倍数被剔除、空白与标样超限、平行超差、培养条件超限(合成数据)
稀释法(不接种),样品做 5、10、20 倍三个稀释倍数,10 倍另做平行瓶。
- 培养时长 125 h 超过 124 h:不符合;培养箱 21.5 ℃ 超出(20±1)℃:不符合;稀释水溶解氧 7.5 mg/L 未达 8 mg/L(4.4):不符合
- 空白消耗 8.90 − 8.20 = 0.70、8.95 − 8.35 = 0.60 mg/L(均值 0.65),稀释法空白不能超过 0.5 mg/L(9.1):不符合,应检查污染来源
- 标准样品(20 / 1000 mL,培养前 8.80、培养后 5.30):ρ = (3.50 − 0.65 × 0.98) ÷ 0.02 = 143.15 mg/L,不在 180~230 mg/L(9.2):不符合,应检查接种液、稀释水的质量
- 5 倍(200 / 1000 mL):培养后剩余 1.20 mg/L <2 mg/L;20 倍(50 / 1000 mL):消耗 8.70 − 7.10 = 1.60 mg/L <2 mg/L(7.2.1.1)——这两个稀释倍数不参与平均,只剩 10 倍(培养前 8.60、培养后 5.00):ρ = (3.60 − 0.65 × 0.9) ÷ 0.1 = 30.15 mg/L,报 30.2 mg/L(拟舍弃的 5 后无数字,保留末位 1 为奇数,进一)
- 平行瓶(培养前 8.58、培养后 6.10):ρ = (2.48 − 0.65 × 0.9) ÷ 0.1 = 18.95 mg/L,RP ≈ 22.8%,超过 3~100 mg/L 档的 ±20%(9.3):不符合。本批空白、标样、培养条件都不合格,结果不能报出
质量控制要求
| 要求 | 条款 | 在立方 LIMS 模板里 |
|---|---|---|
| 每批做两个分析空白试样:稀释法不超过 0.5 mg/L,非稀释接种法和稀释接种法不超过 1.5 mg/L,否则检查污染来源 | 9.1 | 空白少于 2 个不能提交;超限时本批结果判无效(非稀释法不判) |
| 每批做一个标准样品:20 mL 葡萄糖-谷氨酸标准溶液用接种稀释水稀释至 1 000 mL,BOD5 应在 180~230 mg/L,否则检查接种液、稀释水的质量 | 9.2、4.9 | 缺标样不能提交;超范围时本批结果判无效 |
| 每批至少做一组平行样,RP:BOD5 <3 mg/L 时 ≤±15%,3~100 mg/L 时 ≤±20%,>100 mg/L 时 ≤±25% | 9.3 式(6) | 缺平行样不能提交;超限标记须重测(浓度档按两瓶均值判断) |
| 稀释倍数应使溶解氧消耗量不小于 2 mg/L、培养后剩余溶解氧不小于 2 mg/L,剩余为开始浓度的 1/3~2/3 最佳 | 7.2.1.1 | 不满足的稀释倍数不参与平均;1/3~2/3 只作提示 |
| 培养温度(20±1)℃,培养时间 5 d±4 h 或(2+5)d±4 h | 第 3 章、5.8 | 超出时本批结果判无效 |
| 稀释水曝气后溶解氧达到 8 mg/L 以上,使用前开口放置 1 h、24 h 内使用;接种稀释水 BOD5 应小于 1.5 mg/L、当天配制当天使用 | 4.4、4.5 | 稀释水溶解氧不足时标记 |
| 非稀释法和非稀释接种法只适用于 BOD5 不大于 6 mg/L 的样品 | 第 1 章、7.1 | 超过 6 mg/L 时标记改用稀释法 |
常见错误
- 稀释倍数不满足条件也参与平均。7.2.1.1 要求消耗溶解氧不小于 2 mg/L、剩余不小于 2 mg/L;8.3 只对满足要求的稀释倍数结果取平均,不满足的不能参与。不能准确选择稀释倍数时,一个样品做 2~3 个稀释倍数(7.2.1.1)。
- 稀释法不扣空白或用错 f₁。式(5)中空白消耗要乘稀释水所占比例 f₁ 再扣除,然后除以原样品比例 f₂。直接用 (ρ₁ − ρ₂) ÷ f₂ 不扣空白,稀释倍数越大,稀释水本身耗氧被放大得越多。
- 不接种测酸碱、高温或经氯化的废水。第 3 章和 7.1 指出,这类废水微生物不足,须接种;有难降解有机物或剧毒物质时还要用驯化接种液(4.2.4)。
- 含硝化细菌的样品不加硝化抑制剂。7.1.1.1、7.2.1.1 规定试样中含有硝化细菌、有可能发生硝化反应时,每升试样(培养液)加 2 mL 丙烯基硫脲硝化抑制剂;空白试样需要时也同样加入(7.1.1.2、7.2.1.2)。
- 试样温度、溶解氧未调好就装瓶。测定前试样温度应达到(20±2)℃;溶解氧低的要曝气 15 min,过饱和的要振荡赶出(7.1.1.1、7.2.1.1)。
- 报告不注明前处理。8.3 要求报告注明样品是否经过过滤、冷冻或均质化处理;6.2.4 还指出样品中有大量藻类时 BOD5 测定结果会偏高,精度要求较高时应过滤,并在检测报告中注明滤膜孔径。
原始记录预览


立方 LIMS 模板库里按本标准预置的原始记录《五日生化需氧量(BOD5)测定原始记录(HJ 505-2009)》包含以下内容(只读预览,不提供空白表下载)。字段、仪器与质控项按模板草稿列出,未经持证人员抽检;标“模板口径”的项含模板自定的算法、取值或判定方式,标准原文没有逐字这样规定;与上文不一致处,以上文和标准原文为准:
- 基本信息
- 分析批/任务、样品编号、测定方法、溶解氧测定方法、加入丙烯基硫脲硝化抑制剂(每升 2 mL)、样品经 1.6 μm 滤膜过滤、样品经冷冻保存、样品经均质化处理、接种液来源、葡萄糖-谷氨酸标准溶液(批号)
- 仪器设备
- 带风扇的恒温培养箱(20±1)℃、溶解氧测定仪、滴定管(碘量法测溶解氧)
- 培养条件与稀释水
- 培养方式、开始培养时间、结束培养时间、培养时长、培养箱温度、稀释水溶解氧(曝气后)
- 培养瓶(样品各稀释倍数、平行、空白、标准样品)
- 溶解氧瓶号、原样品(标准溶液)体积、稀释后培养液总体积、培养前溶解氧 ρ1(空白为 ρ3)、培养后溶解氧 ρ2(空白为 ρ4)、培养前后溶解氧之差、原样品在培养液中所占比例 f2、稀释水(接种稀释水)在培养液中所占比例 f1、BOD5(逐瓶)
- 结果
- 空白试样溶解氧消耗 ρ3−ρ4(均值)、满足要求的稀释倍数个数、样品 BOD5(满足要求的稀释倍数结果平均)
- 质量控制
- 培养时间 5 d±4 h 或 (2+5) d±4 h、培养温度(20±1)℃、稀释水溶解氧达到 8 mg/L 以上、每批做两个分析空白试样、空白试样:稀释法 ≤0.5 mg/L,非稀释接种法与稀释接种法 ≤1.5 mg/L、每批做一个葡萄糖-谷氨酸标准样品、标准样品 BOD5 在 180~230 mg/L、稀释样品溶解氧消耗量不小于 2 mg/L、培养后剩余溶解氧不小于 2 mg/L、剩余溶解氧为开始浓度的 1/3~2/3 为最佳、至少有一个满足要求的稀释倍数、非稀释法/非稀释接种法 BOD5 不大于 6 mg/L、不超过测定上限 6 000 mg/L、每批至少做一组平行样、平行样相对百分偏差 RP:<3 mg/L ≤15%,3~100 mg/L ≤20%,>100 mg/L ≤25%
- 计算公式
- BOD5(逐瓶)、样品 BOD5(满足要求的稀释倍数结果平均)
- 记录信息
- 模板版本、打印时间、修改次数
- 签名
- 检测人、校核人、审核人
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准:生态环境部 标准文本页(HJ 505-2009 发布稿 PDF)。本页只写要点并注明条款号,不转载标准原文。
相关
在立方 LIMS 中使用本方法
立方 LIMS 的模板中心里有按 HJ 505-2009 预置的原始记录模板(草稿,未经持证人员抽检):由本机构质量负责人审核、发布后即可使用。检测员当场录入读数,公式、修约和质控判定自动完成,算出的值不能手改,每次修改都保留原值、修改人、时间和原因。也可以在模板编辑器里复制后按本机构的作业指导书修改。
也可以先看使用教程。
编写与核对说明
编写与核对说明:立方 LIMS 依据官方原文编写,公式与条款逐条对照原文核对,计算示例由公式引擎实算;核对日期 2026-11-02。
本页由立方 LIMS 团队编写,正文由 AI(agent)起草,未经持证人员逐页审核;依据 HJ 505-2009,条款号见各处括注。示例为合成数据。标准状态于 2026-11-02 核查。2026-11-02 另做了一轮深度复查:页面上的每条说法逐条对照原文页面核对(已叠加修改单与勘误),每个计算值用独立程序按原文公式复算。发现错误请来电告诉我们。
