方法身份
- 现行版
- GB 5009.82-2016
- 名称
- 食品安全国家标准 食品中维生素A、D、E的测定
- 发布日期
- 2016-12-23
- 实施日期
- 2017-06-23
- 代替
- GB/T 5009.82-2003；GB 5413.9-2010；GB/T 9695.26-2008；GB/T 9695.30-2008；NY/T 1598-2008
- 状态
- 现行（食品安全国家标准数据检索平台公布勘误 3 条：2018-06-05 更正 17.4.2（称取维生素 D₂ 标准品改为维生素 D₃ 标准品）；2020-10-10 更正 17.3.2、24.3.2 维生素 D₃ 标准品 CAS 号为 67-97-0。均为编辑性勘误，本页未引用这些条款） · 2026-11-02 核查
适用范围
- 第一法（反相高效液相色谱法）适用于食品中维生素 A 和维生素 E 的测定。（第 1 章）
- 第二法（正相高效液相色谱法）适用于食用油、坚果、豆类和辣椒粉等食物中维生素 E 的测定。（第 1 章）
- 第三法（液相色谱串联质谱法）适用于食品中维生素 D₂ 和维生素 D₃ 的测定；第四法（高效液相色谱法）适用于配方食品中维生素 D₂ 或维生素 D₃ 的测定。（第 1 章）
- 第一法：取样 5 g、定容 10 mL 时，维生素 A 紫外检出限 10 μg/100 g、定量限 30 μg/100 g；生育酚紫外检出限 40 μg/100 g、定量限 120 μg/100 g。（第 8 章）
- 第二法：取样 2 g、定容 25 mL 时，各生育酚检出限 50 μg/100 g、定量限 150 μg/100 g。（第 15 章）
- 第三法：取样 2 g 时，维生素 D₂ 检出限 1 μg/100 g、定量限 3 μg/100 g；维生素 D₃ 检出限 0.2 μg/100 g、定量限 0.6 μg/100 g。第四法：取样 10 g 时，维生素 D₂ 或 D₃ 检出限 0.7 μg/100 g、定量限 2 μg/100 g。（第 22 章、第 29 章）
原理：第一法：试样皂化（含淀粉先酶解）、提取、净化、浓缩后，用 C₃₀ 或 PFP 反相柱分离，紫外或荧光检测，外标法定量（第 2 章）。第三法加同位素内标，串联质谱检测、内标法定量（第 16 章）；第四法正相半制备净化后反相色谱测定，内标法或外标法定量（第 23 章）。
计算公式与符号说明
第一法 维生素 A 或维生素 E 含量（第 6 章 式(1)）
X = ρ × V × f × 100 ÷ m
- X
- 试样中维生素 A 或维生素 E 的含量，维生素 A：μg/100 g；维生素 E：mg/100 g
- ρ
- 根据标准曲线计算得到的试样中维生素 A 或维生素 E 的浓度，μg/mL
- V
- 定容体积，mL
- f
- 换算因子：维生素 A 取 1，维生素 E 取 0.001
- 100
- 试样中量以每 100 克计算的换算系数
- m
- 试样的称样量，g
f = 0.001 的作用是把维生素 E 的结果从 μg 换成 mg，所以维生素 A 与维生素 E 的报出单位不同。
维生素 E 以 α-生育酚当量（α-TE）表示（第 6 章 注、第 13 章 注）
维生素 E（mg α-TE/100 g）= α-生育酚 + β-生育酚 × 0.5 + γ-生育酚 × 0.1 + δ-生育酚 × 0.01
- α-、β-、γ-、δ-生育酚
- 按式(1)或式(2)算得的各生育酚含量，mg/100 g
只有要求以 α-TE 表示时才用此式；原文为注，没有式号。
第二法 各生育酚含量（第 13 章 式(2)）
X = ρ × V × f × 100 ÷ m
- X
- 试样中 α-、β-、γ- 或 δ-生育酚的含量，mg/100 g
- ρ
- 根据标准曲线计算得到的试样中该生育酚的浓度，μg/mL
- V
- 定容体积，mL
- f
- 换算因子，f = 0.001
- 100
- 以每百克计算的换算系数
- m
- 试样的称样量，g
第三法、第四法 维生素 D₂ 或 D₃ 含量（第 20 章 式(3)、第 27 章 式(4)）
X = ρ × V × f × 100 ÷ m
- X
- 试样中维生素 D₂（或维生素 D₃）的含量，μg/100 g
- ρ
- 根据标准曲线计算得到的试样中维生素 D₂（或 D₃）的浓度，μg/mL
- V
- 定容体积（第四法为正己烷定容体积），mL
- f
- 稀释倍数（第四法为待测液稀释过程的稀释倍数）
- 100
- 以每 100 克计算的换算系数
- m
- 试样的称样量，g
这里的 f 是稀释倍数，不是第一法的单位换算因子。试样同时含 D₂ 和 D₃ 时，维生素 D 以两者含量之和计（第 20 章 注）。
标准溶液浓度校正（附录 B 式(B.1)）
X = A × 10⁴ ÷ E
- X
- 维生素标准稀释液浓度，μg/mL
- A
- 维生素稀释液的平均紫外吸光值（1 cm 石英比色杯，无水乙醇作参比）
- 10⁴
- 换算系数
- E
- 维生素 1% 比色光系数，各维生素的测定波长与 E 值见原文表 B.1
X 是稀释液的浓度：视黄醇储备液取 50 μL 定容到 10 mL，维生素 D 取 100 μL、生育酚取 500 μL 定容到 10 mL 后测定（附录 B a)～c)），储备液浓度还要乘回相应的稀释倍数。
结果表示
- 四种方法的计算结果都保留三位有效数字。（第 6 章、第 13 章、第 20 章、第 27 章）
- 标准给出了各法的检出限与定量限（第 8、15、22、29 章），但没有规定低于检出限或定量限时的报告写法：标准未规定，机构规定。（机构规定）
计算示例（合成数据）
以下数据为合成数据，只演示计算过程，不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎（十进制运算）在网站构建时算出，修约按本页“结果表示”写明的规则；页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序，按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算：婴儿配方奶粉，第一法维生素 A 与维生素 E（合成数据）
称取试样 5.02 g 皂化、提取、浓缩后用甲醇定容至 10 mL（5.2.1、5.2.4）。临用前先按附录 B 校正视黄醇标准储备溶液：取 50 μL 定容到 10 mL，在 325 nm 测得平均吸光值 0.452。由标准曲线查得试样液浓度见下表。
| 目标物 | 试样液浓度 ρ（μg/mL） | f |
|---|---|---|
| 维生素 A（视黄醇） | 1.25 | 1 |
| α-生育酚 | 24.6 | 0.001 |
| β-生育酚 | 0.65 | 0.001 |
| γ-生育酚 | 3.10 | 0.001 |
| δ-生育酚 | 0.82 | 0.001 |
- 标准稀释液浓度（式 B.1）：X = 0.452 × 10⁴ ÷ 1835 ≈ 2.4632 μg/mL；储备液约为其 200 倍（10 mL ÷ 50 μL），≈ 492.6 μg/mL，用于修正标准系列的标示浓度（显示修约）
- 维生素 A：X = 1.25 × 10 × 1 × 100 ÷ 5.02 ≈ 249.00 μg/100 g，报出 249 μg/100 g（三位有效数字，第 6 章）
- α-生育酚：X = 24.6 × 10 × 0.001 × 100 ÷ 5.02 ≈ 4.9004 mg/100 g，报出 4.90 mg/100 g
- β-、γ-、δ-生育酚同法计算：≈ 0.1295、0.6175、0.1633 mg/100 g
- 以 α-TE 表示：4.9004 + 0.1295 × 0.5 + 0.6175 × 0.1 + 0.1633 × 0.01（各项为显示修约，引擎按未修约值计算）≈ 5.0285，报出 5.03 mg α-TE/100 g
- 维生素 A 结果高于定量限 30 μg/100 g（第 8 章）：符合
边界：维生素 A 低于检出限（合成数据）
一份谷物制品同法测定，称样 5.00 g、定容 10 mL，维生素 A 峰很小；由标准曲线算得的试样液浓度见下表（合成数据）。
| 目标物 | 试样液浓度 ρ（μg/mL） | f |
|---|---|---|
| 维生素 A（视黄醇） | 0.040 | 1 |
| α-生育酚 | 2.85 | 0.001 |
| β-生育酚 | 0.12 | 0.001 |
| γ-生育酚 | 6.40 | 0.001 |
| δ-生育酚 | 1.95 | 0.001 |
- 维生素 A：X = 0.040 × 10 × 1 × 100 ÷ 5.00 = 8 μg/100 g
- 取样 5 g、定容 10 mL 时紫外检出限为 10 μg/100 g（第 8 章）：不符合。结果低于检出限，不按数值报出；标准没有规定此时的写法，按本机构规定（如写“未检出”并注明检出限）。
- 同一试样的维生素 E 仍可报出：α-TE = (2.85 + 0.12 × 0.5 + 6.40 × 0.1 + 1.95 × 0.01) × 10 × 0.001 × 100 ÷ 5.00 ≈ 0.7139，报出 0.714 mg α-TE/100 g（本例 γ-生育酚浓度最高，按 α-TE 折算后小于四种生育酚含量之和）
在立方 LIMS 里，按本方法建好原始记录模板并发布后，这些计算由模板自动完成，算出的值不能手改，修改留痕。免费开通 → · 不注册，先试一下
质量控制要求
| 要求 | 条款 |
|---|---|
| 第一法、第二法：重复性条件下两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10% | 第 7 章、第 14 章 |
| 第三法、第四法（维生素 D）：两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 15% | 第 21 章、第 28 章 |
| 维生素 A、D、E 标准溶液配制后使用前按附录 B 测吸光度校正浓度；维生素 A 储备液 −20 ℃ 避光保存有效期 1 个月，维生素 E 储备液 6 个月，混合中间液半个月 | 3.4.1～3.4.3、附录 B |
| 测定过程中建议每测定 10 个样品用同一份标准溶液或标准物质检查仪器的稳定性 | 5.5、12.5 |
| 第三法待测样液响应值应在标准曲线线性范围内，超出时减少取样量重新处理后进样 | 19.5 |
| 第四法如样品同时含 D₂ 和 D₃ 不能互作内标，改用外标法定量，但需要验证回收率能满足检测要求 | 26.2 |
常见错误
- 维生素 E 漏乘 f = 0.001。式(1)对维生素 E 取 f = 0.001，结果单位是 mg/100 g。按维生素 A 的 f = 1 计算，数值放大 1000 倍，单位也写错。
- 把第三法、第四法的 f 当成单位换算因子。维生素 D 两法式中的 f 是稀释倍数（第 20 章、第 27 章）。未稀释时 f = 1，稀释过要代入实际倍数；照搬第一法的 0.001 会使结果偏小 1000 倍。
- 四种生育酚直接相加当作维生素 E。要求以 α-生育酚当量表示时，β、γ、δ 分别乘 0.5、0.1、0.01 再与 α 相加（第 6 章 注）。由该式推出：直接相加会高估，β、γ、δ-生育酚占比越高，高估越多。
- 标准溶液不做浓度校正。附录 B 要求维生素 A、D、E 标准溶液配制后、使用前测吸光度校正浓度；3.4.1、3.4.2 也要求临用前回温至 20 ℃ 并进行浓度校正。按称量的标示浓度直接定量，不符合原文要求。
- 试剂含醛或过氧化物、操作不避光。无水乙醇须检查不含醛类、乙醚须检查不含过氧化物（3.1.1、3.1.4，检查方法见附录 A），处理过程要避免紫外光照、尽可能避光操作（5.2 警示）。
- 皂化不完全。皂化液冷却后液面有浮油，应补加适量氢氧化钾溶液并适当延长皂化时间（5.2.1.1 注）。
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准：食品安全国家标准数据检索平台 GB 5009.82-2016。本页只写要点并注明条款号，不转载标准原文。
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编写与核对说明
编写与核对说明：立方 LIMS 依据官方原文编写，公式与条款逐条对照原文核对，计算示例由公式引擎实算；核对日期 2026-11-02。
本页由立方 LIMS 团队编写，正文由 AI（agent）起草，未经持证人员逐页审核；依据 GB 5009.82-2016，条款号见各处括注。示例为合成数据。标准状态于 2026-11-02 核查。2026-11-02 另做了一轮深度复查：页面上的每条说法逐条对照原文页面核对（已叠加修改单与勘误），每个计算值用独立程序按原文公式复算。发现错误请来电告诉我们。