方法身份
- 现行版
- GB 5009.168-2016
- 名称
- 食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定
- 发布日期
- 2016-12-23
- 实施日期
- 2017-06-23
- 代替
- GB/T 5009.168-2003；GB/T 22223-2008；GB 5413.27-2010；GB/T 9695.2-2008；GB/T 17376-2008；GB/T 17377-2008；SN/T 2922-2011；NY/T 91-1988
- 状态
- 现行（GB 5009.168-2026《食品中脂肪酸和反式脂肪酸的测定》已于 2026-08-18 发布，2027-08-18 实施，届时代替本版（新版前言：内标法增加乙酰氯-甲醇法、增加反式脂肪酸种类、修改外标法与归一化法的计算公式），本页届时须按新版改版） · 2026-11-02 核查
适用范围
- 适用于食品中总脂肪、饱和脂肪（酸）、不饱和脂肪（酸）的测定。（第 1 章）
- 水解-提取法适用于食品中脂肪酸含量的测定；酯交换法适用于游离脂肪酸含量不大于 2% 的油脂样品；乙酰氯-甲醇法适用于含水量小于 5% 的乳粉和无水奶油样品。（第 1 章）
- 三种定量方法：第一法内标法（以十一碳酸甘油三酯为内标）、第二法外标法、第三法归一化法（给出各脂肪酸占总脂肪酸的百分比）。（第 2 章、第 7 章、第 12 章）
- 水解-提取法称取均匀试样 0.1 g～10 g（精确至 0.1 mg，约含脂肪 100 mg～200 mg），准确加入 2.0 mL 十一碳酸甘油三酯内标溶液；按试样类别选酸水解、碱水解或酸碱水解，动植物油脂直接皂化甲酯化。（5.2.1.1、5.2.1.2）
- 色谱检测条件应满足理论塔板数（n）至少 2000/m、分离度（R）至少 1.25；色谱柱为聚二氰丙基硅氧烷强极性固定相毛细管柱（100 m × 0.25 mm × 0.2 μm）。（5.3.1）
- 各脂肪酸的定量限见原文附录 E。（第 18 章、附录 E）
原理：内标法：加入内标物的试样经水解-乙醚溶液提取脂肪后，在碱性条件下皂化和甲酯化生成脂肪酸甲酯，毛细管气相色谱分析，内标法定量脂肪酸甲酯含量，再按转换系数算出总脂肪、饱和脂肪（酸）、单不饱和脂肪（酸）和多不饱和脂肪（酸）含量（2.1）。
计算公式与符号说明
响应因子（第一法）（6.1 式(2)）
Fᵢ = (ρSᵢ × A₁₁) ÷ (ASᵢ × ρ₁₁)
- Fᵢ
- 脂肪酸甲酯 i 的响应因子
- ρSᵢ
- 混标中各脂肪酸甲酯 i 的浓度，mg/mL
- A₁₁
- 十一碳酸甲酯峰面积（混标中）
- ASᵢ
- 脂肪酸甲酯 i 的峰面积（混标中）
- ρ₁₁
- 混标中十一碳酸甲酯浓度，mg/mL
试样中单个脂肪酸甲酯含量（第一法）（6.1 式(1)）
Xᵢ = Fᵢ × (Aᵢ ÷ A_C11) × (ρ_C11 × V_C11 × 1.0067 ÷ m) × 100
- Xᵢ
- 试样中脂肪酸甲酯 i 含量，g/100 g
- Aᵢ
- 试样中脂肪酸甲酯 i 的峰面积
- A_C11
- 试样中加入的内标物十一碳酸甲酯峰面积
- ρ_C11
- 十一碳酸甘油三酯浓度，mg/mL
- V_C11
- 试样中加入十一碳酸甘油三酯体积，mL
- 1.0067
- 十一碳酸甘油三酯转化成十一碳酸甲酯的转换系数
- m
- 试样的质量（注意单位是 mg），mg
- 100
- 将含量转换为每 100 g 试样中含量的系数
饱和、单不饱和、多不饱和脂肪（酸）（第一法）（6.2～6.4 式(3)～式(9)）
单个脂肪酸 = X_FAMEᵢ × F_FAMEᵢ-FAᵢ；饱和脂肪（酸）、单不饱和脂肪（酸）、多不饱和脂肪（酸）分别为对应各脂肪酸含量之和；F_FAMEᵢ-FAᵢ = M_FAᵢ ÷ M_FAMEᵢ（式(5)）
- X_FAMEᵢ
- 脂肪酸甲酯 i 含量（即式(1)的 Xᵢ），g/100 g
- F_FAMEᵢ-FAᵢ
- 脂肪酸甲酯转化成脂肪酸的系数，见原文附录 D 表 D.1
- M_FAᵢ、M_FAMEᵢ
- 脂肪酸 i、脂肪酸甲酯 i 的分子质量
总脂肪（第一法）（6.5 式(10)、式(11)）
X_Total Fat = Σ(Xᵢ × F_FAMEᵢ-TGᵢ)；F_FAMEᵢ-TGᵢ = (M_TGᵢ × 1/3) ÷ M_FAMEᵢ
- X_Total Fat
- 试样中总脂肪含量，g/100 g
- F_FAMEᵢ-TGᵢ
- 脂肪酸甲酯 i 转化成甘油三酯的系数，见原文附录 D 表 D.1
- M_TGᵢ
- 脂肪酸甘油三酯 i 的分子质量
外标法与归一化法（11.1 式(12)、11.2 式(13)、第 16 章 式(14)）
外标法 Xᵢ = (Aᵢ × m_Sᵢ × F_TGᵢ-FAᵢ) ÷ (A_Sᵢ × m) × 100，总脂肪酸 X_Total FA = ΣXᵢ；归一化法 Yᵢ = (A_Sᵢ × F_FAMEᵢ-FAᵢ) ÷ (ΣA_Sᵢ × F_FAMEᵢ-FAᵢ)
- m_Sᵢ
- 外标法：标准测定液制备中吸取的脂肪酸甘油三酯标准工作液所含标准品的质量，mg
- F_TGᵢ-FAᵢ
- 外标法：各脂肪酸甘油三酯转化为脂肪酸的换算系数，见原文附录 D
- A_Sᵢ
- 外标法：标准测定液中各脂肪酸的峰面积；归一化法：试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积
- Yᵢ
- 归一化法：某个脂肪酸占总脂肪酸的百分比，%
式(14)分母按原文写作 ΣA_Sᵢ × F_FAMEᵢ-FAᵢ，符号说明中 ΣA_Sᵢ 为试样测定液中各脂肪酸甲酯的峰面积之和；式(14)右边没有乘 100，Yᵢ 以 % 表示。外标法与归一化法的式子只列出，本页示例只演示第一法内标法。GB 5009.168-2026 实施后外标法与归一化法计算公式有修改，届时以新版为准。
结果表示
- 第一法、第二法、第三法的结果均保留 3 位有效数字。（6.5、11.2、第 16 章）
- 进舍规则标准未规定，按 GB/T 8170 从未修约值一次修约到位（本页示例同此）。（机构规定）
计算示例（合成数据）
以下数据为合成数据，只演示计算过程，不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎（十进制运算）在网站构建时算出，修约按本页“结果表示”写明的规则；页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序，按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算：内标法测棕榈酸 C16:0（合成数据）
水解-提取法，每份试样准确加入 2.0 mL 十一碳酸甘油三酯内标溶液（5.00 mg/mL，3.4.1）；做两次独立测定。C16:0 的转换系数取附录 D 表 D.1：F_FAME-FA = 0.9481，F_FAME-TG = 0.9950。
| 项目 | C16:0 甲酯 | 十一碳酸甲酯 |
|---|---|---|
| 浓度（mg/mL） | 0.400 | 0.200 |
| 峰面积 | 41250 | 20480 |
| 测定 | m（mg） | C16:0 甲酯峰面积 Aᵢ | 内标峰面积 A_C11 |
|---|---|---|---|
| 第 1 次 | 2000.0 | 302800 | 51320 |
| 第 2 次 | 2010.5 | 301900 | 50760 |
- 式(2)：F = (0.400 × 20480) ÷ (41250 × 0.200) ≈ 0.992970
- 式(1) 第 1 次：Xᵢ = F × (302800 ÷ 51320) × (5.00 × 2.0 × 1.0067 ÷ 2000.0) × 100 ≈ 2.94900 g/100 g（以甲酯计）
- 式(4)：C16:0 脂肪酸 = Xᵢ × 0.9481 ≈ 2.79595 g/100 g
- 第 2 次：Xᵢ ≈ 2.95715 g/100 g，脂肪酸 ≈ 2.80367 g/100 g
- 两次平均 ≈ 2.79981 g/100 g，绝对差值占平均值 ≈ 0.28%，不超过 10%（第 17 章；原文未写明此条是否适用于内标法，本页按机构做法套用，见质控要求）：符合
- 结果保留 3 位有效数字：C16:0 报 2.80 g/100 g
- 计入总脂肪的一项（式(10)）：第 1 次 Xᵢ × 0.9950 ≈ 2.93426 g/100 g；总脂肪是全部脂肪酸甲酯这一项之和
精密度不合格与有效数字（合成数据）
第 2 次测定的称样量 2000.0 mg 与 C16:0 甲酯峰面积 302800 同第 1 次，只有内标峰面积 A_C11 明显偏小（45200）；混合标准溶液与转换系数同上例。
- 第 1 次脂肪酸 ≈ 2.7960 g/100 g；第 2 次内标峰面积 45200，按式(1)(4)算得 ≈ 3.1745 g/100 g
- 绝对差值占平均值 ≈ 12.7%，超过 10%（第 17 章，按机构做法套用于内标法）：不符合——标准未规定超差后的处理，按机构做法宜查找原因重新测定，平均值 2.99 g/100 g 不宜直接报出
- 由式(1)：内标峰面积 A_C11 在分母上，结果与之成反比，同一次测定的全部脂肪酸都受影响；内标溶液须按 5.2.1.1 准确加入 2.0 mL
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质量控制要求
| 要求 | 条款 |
|---|---|
| 重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%。第 17 章排在第三法（归一化法）之后，没有单独的标题说明适用范围，原文未写明是否也适用于第一法内标法和第二法外标法（第一法、第二法本身没有精密度条款）；本页示例按此要求演示内标法，是否这样执行宜在本机构作业指导书中明确 | 第 17 章 |
| 色谱检测条件应满足理论塔板数（n）至少 2000/m，分离度（R）至少 1.25 | 5.3.1 h) |
| 对于组分不确定的试样，第一次检测时不应加内标物，先观察内标物峰位置处是否有干扰峰；有干扰时可依次选用十三碳酸、十九碳酸或二十三碳酸甘油三酯作内标 | 5.2.1.1 注 |
| 十一碳酸甘油三酯内标溶液（5.00 mg/mL）冰箱冷藏可保存 1 个月；混合脂肪酸甲酯标准溶液、单个脂肪酸甲酯标准溶液 −10 ℃ 以下贮存，有效期 3 个月 | 3.4.1～3.4.3 |
| 酯交换法只适用于游离脂肪酸含量不大于 2% 的油脂样品 | 第 1 章、5.2.2 |
常见错误
- 式(1)中试样质量用 g 代入。式(1)中 m 的单位是毫克（mg），ρ_C11 × V_C11 也是 mg。把 2.0000 g 当成 2.0000 代入，结果放大 1000 倍。
- 漏乘 1.0067。内标加入的是十一碳酸甘油三酯，色谱上测的是十一碳酸甲酯，式(1)用 1.0067 把甘油三酯换成甲酯。漏乘时所有脂肪酸结果约偏低 0.7%。
- 把脂肪酸甲酯含量当脂肪酸含量报。式(1)得到的是脂肪酸甲酯含量，饱和、单不饱和、多不饱和脂肪（酸）要乘附录 D 的 F_FAME-FA 换成脂肪酸（式(4)(7)(9)），总脂肪要乘 F_FAME-TG（式(10)）。附录 D 表 D.1 的 F_FAME-FA 均小于 1，直接报甲酯含量会偏高。
- 内标峰被干扰。5.2.1.1 注要求对于组分不确定的试样，第一次检测时不加内标物，观察内标物峰位置处是否有干扰峰，有则依次改用十三碳酸、十九碳酸或二十三碳酸甘油三酯作内标。由式(1)：内标位置有干扰峰时 A_C11 偏大，全部结果偏低。
- 油脂游离脂肪酸较高仍用酯交换法。酯交换法只适用于游离脂肪酸含量不大于 2% 的油脂样品（第 1 章、5.2.2）。游离脂肪酸含量超过 2% 的油脂仍用酯交换法，超出原文规定的适用范围，应选用标准中适用的前处理方法（如水解-提取法，第 1 章）。
- 分离度不够就定量。5.3.1 h) 要求检测条件满足理论塔板数（n）至少 2000/m、分离度（R）至少 1.25。未确认色谱条件满足这两项就定量，与原文要求不符。
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准：食品安全国家标准数据检索平台（GB 5009.168-2016 标准文本）。本页只写要点并注明条款号，不转载标准原文。
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编写与核对说明
编写与核对说明：立方 LIMS 依据官方原文编写，公式与条款逐条对照原文核对，计算示例由公式引擎实算；核对日期 2026-11-02。
本页由立方 LIMS 团队编写，正文由 AI（agent）起草，未经持证人员逐页审核；依据 GB 5009.168-2016，条款号见各处括注。示例为合成数据。标准状态于 2026-11-02 核查。2026-11-02 另做了一轮深度复查：页面上的每条说法逐条对照原文页面核对（已叠加修改单与勘误），每个计算值用独立程序按原文公式复算。发现错误请来电告诉我们。