方法身份
- 现行版
- GB 5009.22-2016
- 名称
- 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定
- 发布日期
- 2016-12-23
- 实施日期
- 2017-06-23
- 代替
- GB/T 5009.22-2003；GB/T 5009.23-2006；GB 5009.24-2010；GB/T 23212-2008；GB/T 18979-2003；SN 0339-1995；SN/T 1664-2005；SN/T 1101-2002；SN 0637-1997；SN/T 1736-2006；NY/T 1286-2007
- 状态
- 现行（GB 5009.22-2026 已于 2026-08-18 发布，2027-02-18 实施，届时代替本版，本页届时须按新版改版。本页已按食品安全国家标准数据检索平台 2020-10-10 发布的标准勘误核对（3.3.5～3.3.8 同位素内标 CAS 号、27.3 中 ρ 的单位为微克每升、附录 A 中 AFT B₂ 摩尔吸光系数 22500）。） · 2026-11-02 核查
适用范围
- 第一法（同位素稀释液相色谱-串联质谱法）、第二法（高效液相色谱-柱前衍生法）、第三法（高效液相色谱-柱后衍生法）适用于谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、油脂及其制品、调味品、婴幼儿配方食品和婴幼儿辅助食品中 AFT B₁、B₂、G₁、G₂ 的测定。（第 1 章）
- 第四法（酶联免疫吸附筛查法）适用于上述食品中 AFT B₁ 的测定；第五法（薄层色谱法）适用于谷物、豆类、坚果及籽类、油脂、调味品中 AFT B₁ 的测定（不含婴幼儿食品）。（第 1 章）
- 称样 5 g 时：第一法、第二法四种毒素检出限均为 0.03 μg/kg、定量限均为 0.1 μg/kg；第三法各衍生方式与无衍生器法的检出限、定量限分别列出（见原文第 22 章）。（第 8、15、22 章）
- 第四法称样 5 g 时：谷物、坚果、油脂、调味品检出限 1 μg/kg、定量限 3 μg/kg；特殊膳食用食品检出限 0.1 μg/kg、定量限 0.3 μg/kg。第五法 AFT B₁ 检出限 5 μg/kg。（第 29、35 章）
原理：第一法：试样用乙腈-水或甲醇-水溶液提取，提取液经免疫亲和柱净化富集，液相色谱分离、串联质谱检测，以同位素内标法定量（第 2 章）。
计算公式与符号说明
第一法 同位素稀释液相色谱-串联质谱法（第 6 章 式(1)）
X = ρ × V₁ × V₃ × 1000 ÷ (V₂ × m × 1000)
- X
- 试样中 AFT B₁、B₂、G₁ 或 G₂ 的含量，μg/kg
- ρ
- 进样溶液中该毒素按内标法在标准曲线中对应的浓度，ng/mL
- V₁
- 试样提取液体积（植物油脂、固体、半固体按加入的提取液体积；酱油、醋按定容总体积），mL
- V₃
- 样品经净化洗脱后的最终定容体积，mL
- 1000
- 换算系数
- V₂
- 用于净化分取的样品体积，mL
- m
- 试样的称样量，g
第二法式(2)（第 13 章，ρ 按外标法得到，V₃ 为净化液最终定容体积，V₂ 为净化柱净化后的取样液体积）与第三法式(3)（第 20 章，ρ 按外标法得到，V₂ 为用于免疫亲和柱的分取样品体积）形式相同。
第四法 酶联免疫吸附筛查法（AFT B₁）（27.3 式(4)）
X = ρ × V × f ÷ m
- X
- 试样中 AFT B₁ 的含量，μg/kg
- ρ
- 待测液中黄曲霉毒素 B₁ 的浓度（按试剂盒说明书方法由标准工作曲线计算），μg/L
- V
- 提取液体积（固态样品为加入提取液体积，液态样品为样品和提取液总体积），L
- f
- 在前处理过程中的稀释倍数
- m
- 试样的称样量，kg
注意本式 V 以升、m 以千克计。阳性样品需用第一法、第二法或第三法进一步确认（27.3）。第五法薄层色谱法的结果计算见原文 33.2.1.6。
结果表示
- 第一法、第二法、第三法计算结果保留三位有效数字。（第 6、13、20 章）
- 第四法计算结果保留小数点后两位。（27.3）
- 第一法至第三法只规定两次独立测定结果的允许差（第 7、14、21 章），没有规定以两次测定的算术平均值报出；下面示例报两次平均值是机构规定。第四法、第五法原文规定以两份平行测定的算术平均值为结果（第 28、34 章）。进舍规则标准未规定，示例按 GB/T 8170。（机构规定）
- 标准给出了检出限和定量限，但没有规定低于检出限时的报告写法，按本机构的程序文件执行。（第 8、15、22、29、35 章）
计算示例（合成数据）
以下数据为合成数据，只演示计算过程，不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎（十进制运算）在网站构建时算出，修约按本页“结果表示”写明的规则；页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序，按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算：玉米中 AFT B₁，第一法式(1)（合成数据）
一般固体样品称取 5 g，加 100 μL 同位素内标工作液和 20.0 mL 乙腈-水溶液（84+16）提取（5.2.2.1）；准确移取 4 mL 上清液加 46 mL 1% Triton X-100 的 PBS 过免疫亲和柱（5.3.1.1），洗脱液吹至近干后用 1.0 mL 初始流动相溶解（5.3.1.3）。两次独立测定，ρ 为内标法由标准曲线得到的进样溶液浓度。
| 项目 | 第一次 | 第二次 |
|---|---|---|
| 称样量 m（g） | 5.00 | 5.02 |
| 进样溶液 AFT B₁ 浓度 ρ（ng/mL） | 2.35 | 2.48 |
- 第一次：X = 2.35 × 20.0 × 1.0 × 1000 ÷ (4 × 5.00 × 1000) = 2.35 μg/kg
- 第二次：X = 2.48 × 20.0 × 1.0 × 1000 ÷ (4 × 5.02 × 1000) ≈ 2.4701 μg/kg（显示修约）
- 平均值 ≈ 2.4101 μg/kg，绝对差值 ≈ 0.1201 μg/kg，不超过平均值的 20%（第 7 章）：符合；高于定量限 0.1 μg/kg（第 8 章）：符合
- 按机构规定报两次平均值，保留三位有效数字（第 6 章）：报 2.41 μg/kg
边界：结果介于检出限与定量限之间（合成数据）
同样的前处理（V₁ = 20.0 mL、V₂ = 4 mL、V₃ = 1.0 mL），另一份大米样品进样溶液浓度很低。
| 项目 | 第一次 | 第二次 |
|---|---|---|
| 称样量 m（g） | 5.01 | 4.99 |
| 进样溶液 AFT B₁ 浓度 ρ（ng/mL） | 0.065 | 0.071 |
- 第一次 X ≈ 0.0649 μg/kg，第二次 X ≈ 0.0711 μg/kg，平均 ≈ 0.0680 μg/kg（显示修约）
- 不低于检出限 0.03 μg/kg：符合；不低于定量限 0.1 μg/kg：不符合
- 已检出但低于定量限，按三位有效数字修约的数值 0.0680 μg/kg 不宜作为定量结果直接报出；标准没有规定这种情况的写法，按本机构程序文件处理。精密度（第 7 章）：符合。
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质量控制要求
| 要求 | 条款 |
|---|---|
| 第一法、第二法、第三法：重复性条件下两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 20% | 第 7、14、21 章 |
| 第四法：每个试样称取两份平行测定，以算术平均值为结果，相对相差不大于 20%；第五法相对相差不大于 60% | 第 28、34 章 |
| 第一法标准曲线以毒素与对应内标峰面积比对浓度作图，线性相关系数应大于 0.99；待测液响应超出线性范围时应减少取样量重新测定 | 5.7、5.8 |
| 第一法定性：保留时间与标准相比变化在 ±2.5% 之内；两个子离子相对丰度比与标准溶液相比的允许偏差按原文表 3 | 5.6 |
| 第一法至第三法均做空白试验（不称取试样，按同样步骤），应确认不含有干扰待测组分的物质 | 5.9、12.6.3、19.5.3 |
| 第四法所用商品化试剂盒需按附录 E 方法验证合格后方可使用；阳性样品需用第一法、第二法或第三法确认 | 第 24 章、27.3 |
常见错误
- 第四法 V、m 只换算了一个单位。式(4)中 ρ 以 μg/L、V 以 L、m 以 kg 计。V 与 m 只换算了一个（如 V 按 25 mL 写成 25，m 却按 0.005 kg 代入），结果就差 1000 倍；应统一按原文单位代入。
- V₂ 取成提取液总体积。式(1)～式(3)的 V₂ 是分取去净化的体积（第一法上清液 4 mL），V₁ 才是提取液体积（20 mL）。两者混淆，结果相差 5 倍。
- 酱油、醋的 V₁ 按加入量算。第 6 章符号说明规定酱油、醋的 V₁ 按定容总体积（5.2.1.2 定容至 25 mL），植物油脂、固体、半固体才按加入的提取液体积。
- 响应超出曲线仍直接计算。5.8 要求待测样液响应在标准曲线线性范围内，超过时减少取样量重新测定（第二、三法为稀释后重新进样，12.6.2、19.5.2）。
- 把酶联免疫筛查结果直接当确证结果。第四法为筛查法，27.3 规定阳性样品需用第一法、第二法或第三法进一步确认。
- 精密度按 10% 判。本标准第一至三法精密度要求为两次结果绝对差值不超过平均值的 20%（第 7、14、21 章），第五法相对相差不大于 60%（第 34 章）。按 10% 判，绝对差值在平均值 10%～20% 之间的合格结果会被判为不合格。
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准：食品安全国家标准数据检索平台 GB 5009.22-2016。本页只写要点并注明条款号，不转载标准原文。
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在立方 LIMS 中使用本方法
在立方 LIMS 里，可以先用通用原始记录开展本方法，或在模板中心“一键为方法建模板”，按本页的公式与质控条款在模板编辑器里建好本机构的专用模板，经审核发布后使用；录入、计算、修约与质控判定都留痕。
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编写与核对说明
编写与核对说明：立方 LIMS 依据官方原文编写，公式与条款逐条对照原文核对，计算示例由公式引擎实算；核对日期 2026-11-02。
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