方法身份
- 现行版
- GB/T 6432-2018
- 名称
- 饲料中粗蛋白的测定 凯氏定氮法
- 发布日期
- 2018-09-17
- 实施日期
- 2019-04-01
- 代替
- GB/T 6432-1994
- 状态
- 现行 · 2026-11-02 核查
- 相关标准
- GB/T 601（本标准 4.11 引用，用于盐酸标准滴定溶液的配制和标定）
适用范围
- 适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中粗蛋白质的测定。（第 1 章）
- 试样按 GB/T 14699.1 采样、四分法缩减，按 GB/T 20195 制备，粉碎后全部通过 0.42 mm 试验筛。（第 6 章）
- 两种试验步骤：半微量法（仲裁法，消煮液定容 100 mL 后移取 10 mL～20 mL 蒸馏）和全量法（消煮液全部蒸馏，也可用半自动、全自动定氮仪）。（7.1、7.2）
- 平行做两份试验，称取试样 0.5 g～2 g（含氮量 5 mg～80 mg，准确至 0.0001 g）；凯氏烧瓶消煮至透明蓝绿色后继续加热至少 2 h，或消煮管 420 ℃ 消化 1 h。（7.1.1）
- 盐酸标准滴定溶液 c(HCl) = 0.1 mol/L 或 0.02 mol/L，按 GB/T 601 配制和标定；全量法用 0.1 mol/L 滴定。（4.11、7.1.3、7.2.3）
原理：试样在催化剂作用下经硫酸消解，含氮化合物转化成硫酸铵；加碱蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后以盐酸标准滴定溶液滴定，测出氮含量，乘以 6.25 计算粗蛋白质含量（第 3 章）。
计算公式与符号说明
粗蛋白质质量分数（第 8 章 式(1)）
w = [(V₂ − V₁) × c × (14 ÷ 1000) × 6.25] ÷ (m × V′ ÷ V) × 100
- w
- 试样中粗蛋白质含量（质量分数），%
- V₂
- 滴定试样所消耗盐酸标准滴定溶液的体积，mL
- V₁
- 滴定空白所消耗盐酸标准滴定溶液的体积，mL
- c
- 盐酸标准滴定溶液的浓度，mol/L
- m
- 试样质量，g
- V
- 试样消煮液总体积，mL
- V′
- 蒸馏用消煮液体积，mL
- 14
- 氮的摩尔质量，g/mol
- 6.25
- 氮换算成粗蛋白的平均系数
半微量法 V = 100 mL、V′ 为移取的 10 mL～20 mL；全量法消煮液全部蒸馏，V′ = V，比值为 1。
结果表示
- 每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果，计算结果表示至小数点后两位。（第 8 章）
- 进舍规则标准未规定，按 GB/T 8170 从未修约的平均值一次修约到位（本页示例同此）。（机构规定）
计算示例（合成数据）
以下数据为合成数据，只演示计算过程，不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎（十进制运算）在网站构建时算出，修约按本页“结果表示”写明的规则；所用公式就是本库专用模板里的那一份；页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序，按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算：全量法，粗蛋白 10%～25% 档（合成数据）
全量法（7.2），0.1 mol/L 盐酸标准滴定溶液，标定浓度 c = 0.1000 mol/L；空白（0.5 g 蔗糖代替试样，7.4）消耗 V₁ = 0.10 mL。
| 平行 | m（g） | V（mL） | V′（mL） | V₂（mL） |
|---|---|---|---|---|
| 第 1 份 | 0.5000 | 100.0 | 100.0 | 6.10 |
| 第 2 份 | 0.5100 | 100.0 | 100.0 | 6.25 |
- 第 1 份：w = (6.10 − 0.10) × 0.1000 × 14 ÷ 1000 × 6.25 ÷ (0.5000 × 100.0 ÷ 100.0) × 100 = 10.5%
- 第 2 份：w = (6.25 − 0.10) × 0.1000 × 14 ÷ 1000 × 6.25 ÷ (0.5100 × 100.0 ÷ 100.0) × 100 ≈ 10.5515%
- 算术平均值 ≈ 10.5257% → 表示至小数点后两位（第 8 章），报 10.53%
- 精密度：单次结果与平均值的绝对差值占平均值 ≈ 0.24%，10%～25% 档不超过 2%（第 9 章）：符合
- 空白消耗 0.10 mL，0.1 mol/L 盐酸不得超过 0.2 mL（7.4）：符合；全量法 V′ = V（7.2）：符合
半微量法：定容后分取蒸馏，低含量档（合成数据）
半微量法（仲裁法，7.1），消煮液定容 100.0 mL，移取 10.0 mL 蒸馏；0.02 mol/L 盐酸，c = 0.0200 mol/L，空白 V₁ = 0.20 mL。
- 第 1 份：w = (3.20 − 0.20) × 0.0200 × 14 ÷ 1000 × 6.25 ÷ (1.0000 × 10.0 ÷ 100.0) × 100 = 5.25%
- 第 2 份：V₂ = 3.30 mL → w = 5.425%
- 平均值 5.3375% → 表示至小数点后两位，报 5.34%（拟舍部分为 75，进一）
- 精密度 ≈ 1.64%，小于 10% 档不超过 3%（第 9 章）：符合；0.02 mol/L 盐酸空白 0.20 mL 不超过 0.3 mL（7.4）：符合
质控不合格：空白超限、高含量档精密度超限（合成数据）
- 空白消耗 0.1 mol/L 盐酸 0.25 mL，超过 0.2 mL（7.4）：不符合——超限后如何处理标准未规定，本机构规定检查试剂后重做
- 另一试样粗蛋白高于 25%，两份结果与其平均值的绝对差值占平均值超过 1%（第 9 章）：不符合；超差后如何处理标准未规定，本机构规定重新测定
质量控制要求
| 要求 | 条款 | 在立方 LIMS 模板里 |
|---|---|---|
| 精确称取 0.5 g 蔗糖代替试样做空白测定：消耗 0.1 mol/L 盐酸标准滴定溶液不得超过 0.2 mL，消耗 0.02 mol/L 的不得超过 0.3 mL | 7.4 | 超限时本批结果判无效 |
| 蒸馏步骤查验：精确称取 0.2 g 硫酸铵代替试样操作，测得硫酸铵含氮量应为 (21.19 ± 0.2)%，否则检查加碱、蒸馏和滴定各步骤 | 7.3 | — |
| 每个试样平行做两份，以算术平均值为测定结果 | 7.1.1、第 8 章 | — |
| 精密度：两次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值与该平均值之比，粗蛋白 >25% 时不超过 1%，10%～25% 时不超过 2%，<10% 时不超过 3% | 第 9 章 | 超限时标记须重新测定 |
| 蒸馏时蒸汽发生器水中加甲基红指示剂数滴和硫酸数滴，保持橙红色，否则补加硫酸 | 7.1.2 | — |
常见错误
- 精密度按两次之差除以平均值算。第 9 章的判据是“单次结果与平均值的绝对差值”除以平均值，等于两次之差除以两次之和，只有“两次之差÷平均值”的一半。按后者计算，比值是正确值的 2 倍，比值在限值一半到限值之间的合格结果会被判成超限。
- 半微量法漏乘分取比。半微量法定容 100 mL 后只移取 10 mL～20 mL 蒸馏，式(1)分母的 m × V′ ÷ V 不能省略。漏掉 V′/V，结果会小 5～10 倍。
- 空白不扣或空白超限仍出结果。式(1)用 V₂ − V₁ 扣除空白；7.4 规定空白消耗 0.1 mol/L 盐酸不超过 0.2 mL、0.02 mol/L 不超过 0.3 mL。空白超限时如何处理标准未规定，本机构规定先查明原因再出结果。
- 长期不做蒸馏步骤查验。7.3 用硫酸铵检查加碱、蒸馏和滴定是否正确，含氮量应为 (21.19 ± 0.2)%，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤。
- 消煮不完全就蒸馏。7.1.1.1 要求消煮至呈透明的蓝绿色后再继续加热至少 2 h，未达到即停止消煮不符合 7.1.1.1。
- 盐酸标准滴定溶液浓度凭标称值填。4.11 要求按 GB/T 601 配制和标定，式(1)中的 c 应取标定结果（如 0.1003 mol/L），而不是标称的 0.1 mol/L，否则所有结果按同一比例偏差。
原始记录预览
立方 LIMS 模板库里按本标准预置的原始记录《饲料中粗蛋白测定原始记录（GB/T 6432-2018）》包含以下内容（只读预览，不提供空白表下载）。字段、仪器与质控项按模板草稿列出，未经持证人员抽检；标“模板口径”的项含模板自定的算法、取值或判定方式，标准原文没有逐字这样规定；与上文不一致处，以上文和标准原文为准：
- 基本信息
- 分析批/任务、分析时间、试验步骤、盐酸标准滴定溶液规格、盐酸标准滴定溶液（批号）、盐酸标准滴定溶液浓度 c、滴定空白所消耗盐酸标准滴定溶液体积 V1
- 仪器设备
- 分析天平（感量 0.0001 g）、消煮炉或电炉、凯氏蒸馏装置或半自动、全自动定氮仪、滴定管
- 方法规定量
- 氮的摩尔质量（式(1)中 14）、氮换算成粗蛋白的平均系数
- 测定与计算
- 样品编号、第1次测定：试样质量 m、第1次测定：试样消煮液总体积 V、第1次测定：蒸馏用消煮液体积 V′、第1次测定：滴定试样所消耗盐酸标准滴定溶液体积 V2、第2次测定：试样质量 m、第2次测定：试样消煮液总体积 V、第2次测定：蒸馏用消煮液体积 V′、第2次测定：滴定试样所消耗盐酸标准滴定溶液体积 V2、第1份：粗蛋白质量分数 w、第2份：粗蛋白质量分数 w、两份算术平均值、测定结果与平均值的绝对差 / 平均值
- 质量控制
- 空白：0.1 mol/L 盐酸 ≤0.2 mL，0.02 mol/L 盐酸 ≤0.3 mL、全量法全部蒸馏（V′=V）、重复性：>25% 时 ≤1%，10%～25% 时 ≤2%，<10% 时 ≤3%
- 计算公式
- 第1份：粗蛋白质量分数 w、两份算术平均值
- 记录信息
- 模板版本、打印时间、修改次数
- 签名
- 检测人、校核人、审核人
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准：国家标准全文公开系统 GB/T 6432-2018（在线预览）。本页只写要点并注明条款号，不转载标准原文。
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在立方 LIMS 中使用本方法
立方 LIMS 的模板中心里有按 GB/T 6432-2018 预置的原始记录模板（草稿，未经持证人员抽检）：由本机构质量负责人审核、发布后即可使用。检测员当场录入读数，公式、修约和质控判定自动完成，算出的值不能手改，每次修改都保留原值、修改人、时间和原因。也可以在模板编辑器里复制后按本机构的作业指导书修改。
也可以先看使用教程。
编写与核对说明
编写与核对说明：立方 LIMS 依据官方原文编写，公式与条款逐条对照原文核对，计算示例由公式引擎实算；核对日期 2026-11-02。
本页由立方 LIMS 团队编写，正文由 AI（agent）起草，未经持证人员逐页审核；依据 GB/T 6432-2018，条款号见各处括注。示例为合成数据。标准状态于 2026-11-02 核查。2026-11-02 另做了一轮深度复查：页面上的每条说法逐条对照原文页面核对（已叠加修改单与勘误），每个计算值用独立程序按原文公式复算。发现错误请来电告诉我们。