方法身份
- 现行版
- GB 4789.10-2016
- 名称
- 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
- 发布日期
- 2016-12-23
- 实施日期
- 2017-06-23
- 代替
- GB 4789.10-2010；SN/T 0172-2010；SN/T 2154-2008
- 状态
- 现行 · 2026-11-02 核查
适用范围
- 第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验。（第 1 章）
- 第二法（平板计数法）适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品的计数；第三法（MPN 计数）适用于含量较低的食品的计数。（第 1 章）
- 第二法选择 2～3 个适宜稀释度，每个稀释度吸取 1 mL 样品匀液，按 0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL 分别涂布三块 Baird-Parker 平板，36 ℃ ± 1 ℃ 培养 24 h～48 h。（8.2、8.3）
原理：第二法：在 Baird-Parker 平板上计数典型菌落，从中挑取可疑菌落做染色镜检、血浆凝固酶等鉴定，以鉴定阳性比例乘典型菌落数并按稀释因子换算（第 8、9 章）。
计算公式与符号说明
单一稀释度计算（9.6 式(1)）
T = A × B ÷ (C × d)
- T
- 样品中金黄色葡萄球菌菌落数，CFU/g（mL）
- A
- 某一稀释度典型菌落的总数（同一稀释度 3 块平板合计），CFU
- B
- 某一稀释度鉴定为阳性的菌落数，个
- C
- 某一稀释度用于鉴定试验的菌落数，个
- d
- 稀释因子
适用于 9.1～9.4 的情形：只有一个稀释度在 20 CFU～200 CFU 之间；最低稀释度小于 20 CFU；某稀释度大于 200 CFU 而下一稀释度无典型菌落；某稀释度大于 200 CFU 而下一稀释度有典型菌落但不在 20～200 CFU。原文对 d 只写“稀释因子”，本页示例按稀释度的小数形式代入（1∶10 记 0.1，1∶100 记 0.01）。
两个连续稀释度计算（9.6 式(2)）
T = (A₁B₁ ÷ C₁ + A₂B₂ ÷ C₂) ÷ (1.1 × d)
- A₁、B₁、C₁
- 第一稀释度（低稀释倍数）典型菌落总数、鉴定为阳性的菌落数、用于鉴定试验的菌落数，CFU / 个 / 个
- A₂、B₂、C₂
- 第二稀释度（高稀释倍数）典型菌落总数、鉴定为阳性的菌落数、用于鉴定试验的菌落数，CFU / 个 / 个
- 1.1
- 计算系数
- d
- 稀释因子（第一稀释度）
2 个连续稀释度的平板典型菌落数均在 20 CFU～200 CFU 之间时使用（9.5）。
结果表示
- 报告每 g（mL）样品中金黄色葡萄球菌数，以 CFU/g（mL）表示；T 值为 0 时，以小于 1 乘以最低稀释倍数报告。（第 10 章）
- 第三法按证实为阳性的试管数查附录 C 的 MPN 检索表，以 MPN/g（mL）报告。（第 13 章）
- 本标准没有规定菌落数的修约位数，按本机构程序文件执行；下面示例按两位有效数字演示，属机构规定。（第 10 章）
计算示例（合成数据）
以下数据为合成数据，只演示计算过程，不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎（十进制运算）在网站构建时算出，修约按本页“结果表示”写明的规则；页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序，按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算：两个连续稀释度均在 20～200 CFU，式(2)（合成数据）
某熟肉制品 25 g 加 225 mL 稀释液制成 1∶10 匀液，再 10 倍递增稀释，取 1∶100、1∶1000 两个稀释度各 1 mL 涂布三块平板（8.1、8.2）。第一稀释度为 1∶100，d 按 0.01 代入。
| 稀释度 | 三块平板典型菌落合计 A | 鉴定菌落数 C | 鉴定阳性数 B |
|---|---|---|---|
| 1∶100 | 86 | 5 | 4 |
| 1∶1000 | 21 | 5 | 4 |
- 两个连续稀释度合计都在 20 CFU～200 CFU（9.5）：第一稀释度 符合，第二稀释度 符合，用式(2)
- 每个稀释度从典型菌落中挑 5 个做鉴定（8.4.3）：符合
- T = (86 × 4 ÷ 5 + 21 × 4 ÷ 5) ÷ (1.1 × 0.01) ≈ 7781.8 CFU/g（显示修约）
- 按机构规定保留两位有效数字：7800 CFU/g，即 7.8 × 10³ CFU/g
边界：典型菌落鉴定全部阴性，T = 0（合成数据）
某样品最低稀释度 1∶10 三块平板典型菌落合计 15 CFU（小于 20 CFU），下一稀释度无典型菌落；挑 5 个鉴定，均为阴性。
- 最低稀释度合计不在 20 CFU～200 CFU 内（范围检查：不符合），属于 9.2 的情形（最低稀释度小于 20 CFU）：计数该稀释度平板上的典型菌落，用式(1)
- T = 15 × 0 ÷ (5 × 0.1) = 0
- T 为 0，按第 10 章以小于 1 乘以最低稀释倍数报告：最低稀释倍数为 10，报 <10 CFU/g
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质量控制要求
| 要求 | 条款 |
|---|---|
| 选择有典型菌落且同一稀释度 3 块平板所有菌落数合计在 20 CFU～200 CFU 之间的平板计数典型菌落 | 8.4.2 |
| 从典型菌落中至少选 5 个可疑菌落（小于 5 个全选）做染色镜检、血浆凝固酶试验，并划线接种血平板观察 | 8.4.3 |
| 按典型菌落数所在范围选用式(1)或式(2)：两个连续稀释度均在 20 CFU～200 CFU 时用式(2)，其他四种情形用式(1) | 9.1～9.5 |
| 每个稀释度吸取 1 mL 匀液按 0.3、0.3、0.4 mL 涂布三块 Baird-Parker 平板，涂布时不要触及平板边缘；平板有水珠时先在 25 ℃～50 ℃ 培养箱干燥 | 8.2 |
| 每递增稀释一次换用一次 1 mL 无菌吸管或吸头 | 8.1.4 |
| Baird-Parker 平板临用时加卵黄亚碲酸钾增菌剂后倾注，使用前在冰箱储存不得超过 48 h | A.3.3 |
常见错误
- A 只取一块平板的菌落数。A 是同一稀释度 3 块平板（0.3 + 0.3 + 0.4 mL，合计 1 mL）的典型菌落总数（8.2、9.6）。只取一块平板，结果只有正确值的约三分之一。
- 不按鉴定阳性比例折算。式(1)、式(2)都要乘 B/C。直接用典型菌落数乘稀释倍数，会把鉴定为阴性的类似菌落也算进去，结果偏高。
- 两个稀释度都在范围内却只算一个。9.5 规定 2 个连续稀释度均在 20 CFU～200 CFU 时用式(2)（含系数 1.1）。只用其中一个稀释度按式(1)算，与标准规定不符。
- 式(2)的 d 用了第二稀释度。式(2)中的 d 是第一稀释度（低稀释倍数）的稀释因子。误用第二稀释度，结果相差 10 倍。
- T = 0 时报“0”或“未检出”。第 10 章规定 T 为 0 时以小于 1 乘以最低稀释倍数报告，如最低稀释度 1∶10 时报 <10 CFU/g。
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准：食品安全国家标准数据检索平台 GB 4789.10-2016。本页只写要点并注明条款号，不转载标准原文。
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