方法身份
- 现行版
- HJ 897-2017
- 名称
- 水质 叶绿素a的测定 分光光度法
- 发布日期
- 2017-12-21
- 实施日期
- 2018-02-01
- 状态
- 现行（前言写明为首次发布） · 2026-11-02 核查
- 相关标准
- GB/T 14581、HJ 494、HJ/T 91（采样）
- 官方原文
- 生态环境部 标准文本页
适用范围
- 适用于地表水中叶绿素a的测定。（第 1 章）
- 丙酮提取液中叶绿素a的检出限 0.04 mg/L；取样体积 200 ml、丙酮提取液 10 ml 时，方法检出限 2 μg/L，测定下限 8 μg/L。（第 1 章）
- 参考过滤体积：富营养、中营养水体 100～200 ml，贫营养水体 500～1000 ml。（6.3.1 表 1）
- 样品 0～4 ℃避光保存运输，24 h 内送实验室过滤（送不到则现场过滤、滤膜避光冷冻运输）；滤膜 −20 ℃避光保存，14 d 内分析完毕。（6.2）
原理：用滤膜截留藻类，研磨破碎细胞，以丙酮溶液提取叶绿素，离心后在 750、664、647、630 nm 测提取液吸光度，按公式计算叶绿素a浓度（第 3 章）。
计算公式与符号说明
试样（丙酮提取液）中叶绿素a（8.1 式(1)）
ρ₁ = 11.85 × (A₆₆₄ − A₇₅₀) − 1.54 × (A₆₄₇ − A₇₅₀) − 0.08 × (A₆₃₀ − A₇₅₀)
- ρ₁
- 试样中叶绿素a的质量浓度，mg/L
- A₆₆₄
- 试样在 664 nm 波长下的吸光度
- A₆₄₇
- 试样在 647 nm 波长下的吸光度
- A₆₃₀
- 试样在 630 nm 波长下的吸光度
- A₇₅₀
- 试样在 750 nm 波长下的吸光度（式(1)各项均减去此值；7.1 要求其小于 0.005）
吸光度用 10 mm 石英比色皿、以丙酮溶液（9+1）为参比测得（5.6、7.1）。
样品中叶绿素a（8.1 式(2)）
ρ = ρ₁ × V₁ ÷ V
- ρ
- 样品中叶绿素a的质量浓度，μg/L
- ρ₁
- 试样中叶绿素a的质量浓度（式(1)），mg/L
- V₁
- 试样的定容体积，ml
- V
- 取样体积，L
注意 V₁ 用 ml、V 用 L，单位换算已含在式中（mg/L × ml ÷ L = μg/L），不要再乘 1000。
结果表示
- 测定结果 <100 μg/L 时保留至整数位；≥100 μg/L 时保留三位有效数字。（8.2）
- 进舍规则标准未规定，按本机构规定；示例按 GB/T 8170 从未修约值一次修约到位。（机构规定）
计算示例（合成数据）
以下数据为合成数据，只演示计算过程，不是任何样品的测量值。每个计算值都由立方 LIMS 产品同一套公式引擎（十进制运算）在网站构建时算出，修约按本页“结果表示”写明的规则；页面上的每个计算值另用一套不经模板与引擎的独立程序，按标准原文公式从本页列出的输入复算一致。
完整计算：富营养湖库水样（合成数据）
富营养水体，按表 1 过滤 200 ml（V = 0.200 L），研磨提取后定容至 10 ml（6.3.2），离心过滤后以丙酮溶液为参比测吸光度（7.1）。
| 波长 | 吸光度 |
|---|---|
| 750 nm | 0.002 |
| 664 nm | 0.215 |
| 647 nm | 0.058 |
| 630 nm | 0.032 |
- 先看 750 nm：0.002 小于 0.005（7.1）：符合，可以计算
- 式(1)：ρ₁ = 11.85 × (0.215 − 0.002) − 1.54 × (0.058 − 0.002) − 0.08 × (0.032 − 0.002) = 2.43541 mg/L
- 式(2)：ρ = 2.43541 × 10 ÷ 0.200 = 121.7705 μg/L
- 结果 ≥100 μg/L，保留三位有效数字（8.2）：报 122 μg/L
修约与 750 nm 吸光度检查：贫营养水样、750 nm 超标（合成数据）
贫营养水体过滤 1000 ml（V = 1.000 L），定容 10 ml。第一次测得 750 nm 吸光度 0.007。
- 750 nm 吸光度应小于 0.005（7.1）：不符合。按 7.1 应重新用针式滤器（0.45 μm，5.7）过滤后测定，本组读数不能用来报结果。
- 假如照算：ρ₁ = 11.85 × (0.038 − 0.007) − 1.54 × (0.018 − 0.007) − 0.08 × (0.015 − 0.007) = 0.34977 mg/L，ρ = 3.4977 μg/L；<100 μg/L 保留至整数位（8.2）为 3 μg/L。这只用来演示修约，不能报出。
在立方 LIMS 里，按本方法建好原始记录模板并发布后，这些计算由模板自动完成，算出的值不能手改，修改留痕。免费开通 → · 不注册，先试一下
质量控制要求
| 要求 | 条款 |
|---|---|
| 每批样品至少做一个实验室空白试验（实验用水按试样相同步骤制备与测定），测定结果应低于方法检出限 | 10.1、6.4、7.2 |
| 每批至少测定 10% 的平行双样，少于 10 个样品时至少一个，平行双样相对偏差 ≤20% | 10.2 |
| 750 nm 吸光度应小于 0.005，否则重新用针式滤器过滤后测定 | 7.1 |
| 过滤负压不超过 50 kPa，样品刚完全通过滤膜时结束抽滤 | 6.3.1 |
| 研磨充分 5 min 以上，定容至 10 ml；4 ℃避光浸泡提取 2 h 以上、不超过 24 h；1000 ×g 离心 10 min | 6.3.2–6.3.4 |
| 采样后每升样品加 1 ml 碳酸镁悬浊液；0～4 ℃避光、24 h 内过滤；滤膜 −20 ℃避光、14 d 内分析 | 6.1、6.2 |
常见错误
- 式(2) 里多乘 1000。式(2) 中 V₁ 以 ml、V 以 L 代入，结果直接就是 μg/L。把 V 换成 ml 或再乘 1000，结果差 1000 倍。
- 不扣 A₇₅₀。式(1) 每个波长都要先减去 750 nm 的吸光度。直接用 A₆₆₄ 等原始读数，ρ₁ 多出 (11.85 − 1.54 − 0.08) × A₇₅₀ = 10.23 × A₇₅₀（由式(1)推出）。
- 750 nm 读数偏大仍然计算。7.1 规定 750 nm 波长处的吸光度应小于 0.005，否则需重新用针式滤器过滤后测定。A₇₅₀ 不小于 0.005 时不能直接代入式(1)。
- 器皿用酸洗、强光下操作。6.3.2 注：叶绿素对光及酸性物质敏感，实验室光线应尽量微弱，能进行分析操作即可，所有器皿不能用酸浸泡或洗涤。
- 采样后不加碳酸镁或超时过滤。6.1 要求在每升样品中加入 1 ml 碳酸镁悬浊液，以防止酸化引起色素溶解；6.2 要求样品 0～4 ℃避光保存、24 h 内运送至实验室过滤，滤膜 −20 ℃避光保存、14 d 内分析完毕。
- 取样体积与表 1 不匹配。6.3.1 要求根据水体的营养状态按表 1 确定取样体积（富营养、中营养 100～200 ml，贫营养 500～1000 ml）。第 1 章的方法检出限 2 μg/L、测定下限 8 μg/L 对应取样 200 ml、定容 10 ml；按式(2)，定容体积不变时取样体积减半，同一提取液检出限对应的样品浓度加倍。
官方原文
公式、条款与限值以官方原文为准：生态环境部 标准文本页。本页只写要点并注明条款号，不转载标准原文。
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在立方 LIMS 中使用本方法
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编写与核对说明
编写与核对说明：立方 LIMS 依据官方原文编写，公式与条款逐条对照原文核对，计算示例由公式引擎实算；核对日期 2026-11-02。
本页由立方 LIMS 团队编写，正文由 AI（agent）起草，未经持证人员逐页审核；依据 HJ 897-2017，条款号见各处括注。示例为合成数据。标准状态于 2026-11-02 核查。2026-11-02 另做了一轮深度复查：页面上的每条说法逐条对照原文页面核对（已叠加修改单与勘误），每个计算值用独立程序按原文公式复算。发现错误请来电告诉我们。